Detektion von Viren
Polymerase-Kettenreaktion ( pro Virus und Zelllinie von 10 Virusarten :
EBV ( HHV-4 ), HBV, HCV, HHV-8, HIV-1, HIV-2, HPV, HTLV-1 / -2, SMRV, XMRV )
www.dsmz.deDetection of viruses
Polymerase chain reaction ( per virus and cell line out of 10 viruses:
EBV ( HHV-4 ), HBV, HCV, HHV-8, HIV-1, HIV-2, HPV, HTLV-1 / -2, SMRV, XMRV )
www.dsmz.deAls Modellsystem für die Bestrahlungsversuche wurden Viruseinschlusskörper des Autographa californica MNPV ( AcMNPV ) verwendet, welche durch gleichzeitige Infektionen ( Co-Infektion ) der Zellen der etablierten und weitverbreiteten Insektenzelllinie Spodoptera frugiperda ( Sf21 ) mit dem Wildtyp-AcMNPV und einem rekombinanten AcOGFP-Virus gewonnen wurden.
Dazu wurden für die Co-Infektion durch Variation der zahlenmäßigen Verhältnisse von Wildtyp- AcMNPV und AcOGFP-Virus pro Zelle ( = MOI ) die geeigneten Bedingungen zur Produktion der Co- Infektions-Einschlusskörper ermittelt .
Die Quantifizierung der Virusaktivität erfolgte mittels Titerbestimmung nach der TCID50-Methode in Mikrotiterplatten (96-Lochplatten), nachdem die Virionen durch eine zuvor entwickelte Prozedur aus den Viruseinschlusskörpern alkalisch freigesetzt wurden.
www.bvt.cbi.uni-erlangen.deThe inclusion bodies were obtained by simultaneous infection ( co-infection ) of cells originating from the established and widespread insect cell line Spodoptera frugiperda ( Sf21 ) with the wildtyp AcMNPV and a recombinant AcOGFP virus.
In order to achieve appropriate coinfection inclusion bodies for the in vitro biotest, suitable production conditions were identified by co-infections with varying ratios of wildtyp AcMNPV to recombinant AcOGFP virus (variation of MOI).
Virus activity was quantified by the 50% tissue-culture infectious dose methode (TCID50-assay) in micro titer plates.
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